脱氧核糖核酸酶II检测

检测项目

1. 酶活性测定：单位定义（U/mg）在pH 4.6条件下水解λ-DNA的速率，检测范围0.1-500 U/mg

2. 纯度分析：SDS-PAGE电泳法测定蛋白纯度≥95%，HPLC法验证杂质蛋白≤3%

3. pH稳定性：在pH 3.0-6.0范围内进行24小时稳定性测试

4. 热稳定性：40℃温育1小时后残余活性≥80%

5. 内毒素检测：鲎试剂法测定≤10 EU/mg

检测范围

1. 重组DNA技术产物中的宿主残留DNA去除效率验证

2. 生物制药纯化工艺中的核酸清除能力评估

3. 基因工程菌发酵液中的酶表达水平分析

4. 体外诊断试剂盒中DNase II活性成分质量控制

5. 食品工业用酶制剂的微生物DNA降解效果测试

检测方法

ASTM E2694-21《核酸酶活性测定标准试验方法》

ISO 21571:2013《食品中核酸提取与纯化技术规范》

GB/T 34799-2017《核酸纯化试剂盒质量评价通则》

GB/T 35809-2018《食品加工用酶制剂活力测定》

USP<1079.2>《生物制品中宿主细胞DNA残留量测定》

检测设备

Thermo Scientific NanoDrop 2000紫外分光光度计：DNA浓度定量分析

Agilent 1260 Infinity II高效液相色谱仪：蛋白纯度与杂质分析

Bio-Rad ChemiDoc MP成像系统：SDS-PAGE电泳结果数字化处理

Eppendorf Mastercycler Nexus梯度PCR仪：DNA底物完整性验证

Malvern Zetasizer Nano ZS动态光散射仪：酶聚合状态监测

Sartorius Cubis II微量天平（精度0.0001g）：精密称量校准

Tecan Infinite M200 Pro酶标仪：高通量酶活动力学分析

Memmert IPP110培养箱：温度稳定性试验环境控制

Cytiva ÄKTA pure蛋白纯化系统：工艺相关杂质去除验证

Lonza PyroGene rFC内毒素检测仪：无动物源内毒素定量分析