柠檬酸合酶检测

检测项目

1. 酶活性测定：催化效率≥50 U/mg（37℃ pH7.4）

2. 比活力测试：≥3.5 μmol/min·mg（NADH氧化法）

3. 蛋白质纯度分析：SDS-PAGE单一条带≥95%

4. 热稳定性评估：50℃处理30min保留活性≥80%

5. 抑制剂效应测试：ATP半数抑制浓度IC50≤2mM

检测范围

1. 重组表达体系：大肠杆菌BL21(DE3)/pET28a表达产物

2. 生物制药中间体：注射级辅料用酶制剂

3. 食品添加剂：发酵乳制品加工用酶

4. 工业酶制剂：固定化载体结合型催化剂

5. 诊断试剂原料：代谢综合征检测试剂盒核心组分

检测方法

1. ISO 9001:2015《质量管理体系-生物催化活性测定通则》

2. GB/T 33409-2016《生物制品中蛋白质纯度测定电泳法》

3. ASTM E2313-20《酶热稳定性差示扫描量热法》

4. GB/T 35808-2018《工业酶制剂活力测定通用方法》

5. ISO 20633:2015《体外诊断试剂用酶类物质技术要求》

检测设备

1. Agilent 1260 Infinity II HPLC系统（纯度分析）

2. Shimadzu UV-2600i紫外分光光度计（动力学测定）

3. Bio-Rad ChemiDoc MP成像系统（电泳定量）

4. Malvern Zetasizer Nano ZSP（分子量测定）

5. TA Instruments Q2000 DSC（热力学分析）

6. Eppendorf Mastercycler X50 PCR仪（温度梯度实验）

7. Thermo Scientific Multiskan SkyHigh酶标仪（高通量筛选）

8. Metrohm 848 Titrino plus自动滴定仪（抑制剂滴定）

9. Beckman Coulter Optima XPN-100超速离心机（样品前处理）

10. Mettler Toledo SevenExcellence pH计（反应体系校准）